当前位置: >首页 > 媒体服务 > 行业动态 > HPLC法对比分析不同的蓝莓提取物
HPLC法对比分析不同的蓝莓提取物
作者:admin  发布时间:2018-10-24 21:36

蓝莓因富含丰富的花青素,对保护视力、缓解眼睛疲劳等具有良好效果,被誉为“美瞳之果”。现代药理学研究表明,花青素具有抗氧化、抗肿瘤、防治心脑血管疾病、促进视力等作用[1],在临床上广泛应用于治疗高血压性视网膜病变等疾病,是眼科药物的主要活性成分[2]。蓝莓提取物是一种略带酸味的深紫色粉末,其由新鲜或冷冻的蓝莓果经提取精制而成。目前,蓝莓提取物在欧洲作为药物使用,在美国和日本则作为保健食品使用。
 
蓝莓果实中存在的花青素种类主要有5种——矢车菊素(Cy)、飞燕草素(Dp)、芍药素(Pn)、牵牛花素(Pt)和锦葵素(Mv),他们以单糖苷形式(阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖)存在[3],其中3-糖苷在自然界中最丰富,而高效液相色谱(HPLC)法测定花青素以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为对照品居多。
 
随着人们生活水平的提高和对视力保护意识的增强,蓝莓提取物日益受到消费者的关注和青睐,也引起了不少生产企业的聚焦。本研究采用高效液相色谱法,以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为对照品,对两个不同厂家的蓝莓提取物与蓝莓鲜果中花青素的含量和种类进行了对比研究,为选购蓝莓提取物提供了有力的质量依据。
 
1 材料与方法
 
1.1 材料与试剂
 
新鲜蓝莓:贵州麻江产地;蓝莓提取物:厂家提供(分别编号A、B);矢车菊素-3-O-葡萄糖苷标准品(≥99%):成都曼思特生物科技有限公司;甲醇:国产色谱纯;甲酸、盐酸等为国产分析纯。
 
1.2 仪器与设备
 
Agilent 1260型高效液相色谱仪:Agilent公司;HH-2型数显恒温水浴锅:国华电器有限公司;AB 204-N型电子天平:METTLER TOLEDO公司;320pH计:MeterMETTLER TOLEDO公司;超声清洗器:南昌科昌达超声波设备厂;离心机:长沙湘智离心机仪器有限公司;超纯水仪:Heal Force Development Ltd。
 
1.3 供试品溶液的制备
 
1.3.1蓝莓供试品溶液制备
 
精确称取新鲜蓝莓6.1924g,研碎,加入50mL 2%的盐酸甲醇溶液(V/V),常温超声提取1h,4000r/min离心15min后取上清液,加2%的盐酸甲醇溶液(V/V)定容至100mL,用0.45μm滤膜过滤即得蓝莓样品。
 
1.3.2蓝莓提取物供试品溶液制备
 
分别精确称取两种提取物样品各10.0mg,加3%的甲酸水溶液(V/V)定容至10mL,用0.45μm滤膜过滤,即得蓝莓提取物样品。
 
1.3.3标准品溶液的制备
 
取矢车菊素-3-O-葡萄糖苷标准品,精密称定,加2%的盐酸甲醇溶液(V/V)制成浓度为0.049mg/mL标准品溶液,用0.45μm滤膜过滤,即得标准品样品。
 
1.4 色谱条件
 
色谱柱:Diamonsil C18 5μm 250×4.6mm;检测波长:525nm;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL,梯度条件见表1。